2020 2021 小美赛 美赛热点话题文献检索 -大鼠 Hsp60 的组织表达、分子进化及真核...

杨利霞

2020 2021 小美赛 美赛热点话题文献检索 -大鼠 Hsp60 的组织表达、分子进化及真核...

HSP60 是热休克蛋白家族的一员，具有重要的生物学功能。为了探讨大鼠 Hsp60 的组织表达、分
子进化，并能构建其真核表达载体，本研究通过 qPCR 技术研究其组织表达谱；从 GenBank 数据库获取其
近缘序列，通过多款软件预测其分子特征、构建其系统发育树、并分析其适应性进化特点；最后，构建真
核表达载体 pcDNA3.1-HSP60，并通过测序和 Western Blot 验证其准确性。结果显示：Hsp60 在大鼠肾、脂
肪、心、胃、肝、脑、肌肉、小肠及肺组织内的表达量依次下降，且在不同物种中的组织表达谱与其分子
进化关系高度一致；大鼠 Hsp60 编码 573 氨基酸，不含信号肽和跨膜序列，以其序列矩阵构建的系统发育
树与普遍接受的物种树高度一致；该基因在哺乳类动物中受强烈负选择作用(ω=0.03)，且不同位点、不同
类群所受选择压力不同，LRT 结果极显著(p<0.01)，其中在啮齿类动物中所受负选择压力最大(ω=0.02)，同
时发现位点 380I 受正选择作用(后验概率 0.91)。此外，测序及 Western Blot 结果表明真核表达质粒构建成
功。综上，大鼠 Hsp60 是一个重要的管家基因，具有较强的系统发育意义，且经历了一定的适应性进化过
程，具有较大的研究价值，所构建的表达载体可为后续该分子的功能和相关疾病研究提供基础。